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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:670
更新時間:2024-11-04
小鼠胰島細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7066 |
細胞簡介:
小鼠胰島分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結構完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%,每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠胰島采用膠原酶灌注消化法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠胰島經(jīng)DTZ染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
碳酸氫 500g
SodiumBite 1kg
四硼酸 5kg
SodiumBorate,Decahydrate 500g
小鼠(E)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin light chain lambda (lambda -IgLC) ELISA Kit 輕鏈lambda(λ-IgLC)試劑盒
Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 人的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGP試劑盒魚骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結合巰基含量熒光定量試劑盒20次
MouseCompleme4,C4ELISAKit小鼠補體蛋白4(C4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FAAP24蛋白抗體
多配體聚糖結合蛋白1抗體
OMG重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽) Protein
AATK peptide 細胞凋亡關聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細胞凋亡關聯(lián)酪激酶抗原
CXCL10重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
COLEC12 Protein Rat 重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白
蛋白二硫鍵異構酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein
SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein
小鼠胰島細胞大鼠促生長激素釋放激素(GRH)試劑盒 ,英文名: GRH ELISA Kit
Mouse 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)試劑盒
ELISA 小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 進口分裝
CLIAKitforLILRB4(Humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4)ELISAKit人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4
通用型ECL化學發(fā)光顯影試劑盒10次
ELISAKit17-KS雞17-同類固醇