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訪問量:747
更新時間:2024-11-05
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產品名稱:兔皮脂腺細胞
組織來源:皮脂腺
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔皮脂腺體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳僀?僀
細胞簡介:
兔皮脂腺分離自皮脂腺組織;皮脂腺是由腺泡與短的導管構成的全漿分泌腺,皮脂腺導管開口于毛囊。除手外的其余部位皮膚中均有皮脂腺,前額、鼻、背上部的皮脂腺多,稱為皮脂溢出部位。其余的部位比較少,掌、足趾及足背沒有皮脂腺。皮脂腺大多位于毛囊及立毛肌之間,由一個或幾個囊狀的腺泡與一個共同的短導管構成。分泌部呈囊泡狀,由多層腺細胞構成。腺泡周邊緊貼基膜的細胞較小,呈扁平或立方形,稱為基細胞。新生的腺細胞不斷向中心移動,體積增加,胞質內的小脂滴越來越多,腺泡中心的細胞更大,細胞核固縮、細胞器消失,胞質內充滿脂滴。后腺細胞解體并與脂滴同時排出,即為皮脂。皮脂腺的分泌因人種、年齡、性別及氣候等因素而不同。10歲以前分泌力弱,16~35歲分泌旺盛,老年期減弱;夏天分泌旺盛,秋冬季分泌較少;過食油膩、辛辣刺激的食物以及按摩也可增加分泌。皮脂腺分泌旺盛,可導致皮膚油膩、皮膚粗糙、毛孔粗大,容易發生粉刺及脂溢性皮炎。皮脂腺,分泌皮脂過少,可導致皮膚干燥、脫屑、皮膚老化等,所以控制皮脂腺的分泌很關鍵。皮脂腺的活動也與多種皮膚疾病相關,例如: 皮脂腺數量或其活動的減少可能會導致皮膚干燥綜合征,特應性皮炎是皮膚屏障功能障礙的炎癥性疾病,研究發現其發病與皮脂腺功能減弱有關 ,毛周角化病的皮損中則沒有皮脂腺。而皮脂分泌過多和尋常痤瘡相關。同時現有研究分析結構化數據特征, 嘗試探索皮脂腺與皮脂腺腫瘤發生的聯系。
方法簡介:
實驗室分離的兔皮脂腺采用聯合機械分離制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔皮脂腺經CK4免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
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