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小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒?操作步驟

日期:2021-11-17瀏覽:757次

小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

磷酸化蛋白激酶B抗體

銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體

?;o酶A合成酶家族4抗體

酸性磷酸酶樣蛋白2抗體

AHNAK核蛋白2抗體

二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

p53誘導(dǎo)蛋白5抗體

錨蛋白重復(fù)域5抗體

腦鈉通道蛋白2抗體

腦鈉通道蛋白4抗體

小腸鈉通道蛋白5抗體

APXL蛋白抗體

酸敏感離子通道蛋白3抗體

天門冬氨酸β羥化酶抗體

精氨酸加壓素受體2抗體

細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體

膜粘連蛋白8抗體

水通道蛋白8抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體

凋亡抑制因子5抗體

水通道蛋白-3抗體

載脂蛋白D抗體

丁?;o酶A合成酶3抗體

脂肪細(xì)胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白)

線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體


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